L'analyse microbiologique de l'air par sédimentation est une méthode utilisée pour évaluer la qualité de l'air en termes de présence de micro-organismes tels que des bactéries, des moisissures, des levures et des spores fongiques. Voici une procédure générale détaillée pour effectuer une analyse microbiologique de l'air par sédimentation:
**1. Préparation des plaques de culture:**
Des boîtes de Pétri contenant des milieux de culture appropriés sont préparées. Pour les bactéries, on utilise souvent un milieu tel que l'agar tryptone soja (TSA), tandis que pour les moisissures et les levures, on peut utiliser l'agar dextrose de pomme de terre (PDA) ou l'agar Sabouraud. Les milieux sont stérilisés et solidifiés avant l'utilisation.
**2. Exposition des plaques:**
Les plaques de culture sont ouvertes et exposées à l'air ambiant pendant une période déterminée pour permettre la sédimentation des particules microbiennes sur la surface du milieu. Cette période peut varier en fonction du protocole d'échantillonnage, mais dure généralement entre 30 minutes et 4 heures.
**3. Incubation des plaques:**
Après l'exposition, les plaques sont refermées et incubées à des températures spécifiques en fonction des micro-organismes d'intérêt. Les bactéries sont généralement incubées à 35-37°C, tandis que les moisissures et les levures sont incubées à une température plus basse, autour de 25-30°C.
**4. Observation et comptage des colonies:**
Après une période d'incubation suffisante, généralement 24 à 48 heures pour les bactéries et jusqu'à 5-7 jours pour les moisissures et les levures, les colonies qui ont poussé sur les plaques sont comptées. Ce comptage permet de déterminer la concentration des micro-organismes dans l'air, souvent exprimée en unités formant colonie par mètre cube d'air (UFC/m³).
**5. Identification des micro-organismes:**
Des tests complémentaires peuvent être effectués pour identifier les espèces ou les groupes de micro-organismes présents. Cela peut inclure l'examen microscopique des colonies, des tests biochimiques, ou l'utilisation de kits d'identification commerciaux basés sur des profils enzymatiques ou génétiques.
**Matériels et produits associés:**
- Boîtes de Pétri et milieux de culture appropriés pour les micro-organismes cibles.
- Incubateur réglable pour fournir les conditions d'incubation requises.
- Loupe binoculaire ou microscope pour l'observation des colonies et l'identification des micro-organismes.
- Produits spécifiques comme le **Active Count 100H** de **Lighthouse Worldwide Solutions** qui est un biocollecteur portatif permettant de collecter des échantillons microbiologiques de l'air.
**Précautions et considérations:**
- La procédure doit être effectuée dans un environnement contrôlé pour éviter la contamination des échantillons par des micro-organismes non liés à l'air ambiant.
- Les plaques de culture doivent être manipulées avec soin pour éviter l'introduction de contaminants.
- La méthode de sédimentation est passive et peut ne pas refléter avec précision les niveaux réels de contamination en cas de faible circulation de l'air. Des méthodes actives d'échantillonnage de l'air, utilisant des appareils comme des pompes d'échantillonnage, peuvent offrir une estimation plus représentative des concentrations microbiennes.
- Il est important de suivre les normes de sécurité biologique et les bonnes pratiques de laboratoire pour manipuler et disposer des échantillons contaminés.
En résumé, l'analyse microbiologique de l'air par sédimentation est une méthode simple mais efficace pour surveiller la qualité de l'air dans les environnements intérieurs et contrôler la présence de contaminants microbiens.
